La purification nouvelle génération

La PCR temps réel est un outil puissant et rapide pour la détection spécifique de bactéries dans les eaux.

Cette méthodologie, très utilisée dans la plupart des pays, fait déjà l’objet d’une norme NF et d’une norme ISO pour la recherche de Legionella spp & Legionella pneumophila dans les eaux potables, sanitaires et industrielles.

La préparation de l’échantillon (extraction & purification de l’ADN) est l’étape la plus importante du protocole.

Avec le kit DNA PURE-FLASH, notre principal objectif a été d’éliminer les inhibiteurs de PCR tout en conservant un rendement élevé.

→ Le kit DNA PURE-FLASH apporte une solution robuste et fiable qui permet une extraction optimale de l’ADN des bactéries présentes tout en assurant l’élimination des inhibiteurs en vue d’une analyse par PCR en temps réel.

Domaines d’application

Le kit DNA PURE-FLASH permet une extraction optimale de l’ADN des bactéries présentes dans les échantillons d’eau.
Il permet de préparer un échantillon en vue d’une analyse par PCR en temps réel qu’il s’agisse d’EAUX POTABLES (filière de traitement, réseau de distribution), d’EAUX SANITAIRES (réseau d’eau chaude, réseau d’eau froide, thermalisme, piscine, forage…) ou d’EAUX INDUSTRIELLES (installations de refroidissement, stations de lavage, arrosage…).

Principe du protocole

1. Concentration des bactéries présentes dans l’échantillon par filtration ou centrifugation puis lyse thermique des cellules.

2. Capture de l’ADN à l’aide de la solution de binding et formation du polyplexe.

3. Capture du polyplexe sur une résine et élimination du surnageant.

4. Ajout de la solution d’élution et récupération de l’ADN par agitation orbitale à 75°C.

Les plus de la technologie
DNA PURE-FLASH

RAPIDE

extraction et purification en moins de 30 minutes

SIMPLE

manipulations claires et faciles

ROBUSTE

applicable pour de nombreuses matrices

EFFICACE

élimination des inhibiteurs de la PCR

PERFORMANT

rendement élevé

FLEXIBLE

compatible avec de nombreux kits PCR

RENDEMENT

50%
sur toutes matrices

PURIFICATION TRÈS EFFICACE

moins d’1%
d’échantillon inhibé

EAUX SANITAIRES
limite de détection

44 UG/l

EAUX INDUSTRIELLES
limite de détection

220 UG/l

Conditionnement pour 96 tests

– 96 tubes contenant (1,3 ml) de lysis buffer DNA PURE-FLASH,
– 4 flacons compte-gouttes (2,0 ml) de binding buffer DNA PURE-FLASH,
– 4 flacons (3,0 ml) d’elution buffer DNA PURE-FLASH,
– 96 tubes de résine WCX,
– 96 microtubes de 2,0 ml,
– 96 microtubes de 1,5 ml,
– 192 cônes effilés.

Matériel nécessaire

– Rampe de filtration,
– Microcentrifugeuse de paillasse,
– Membrane en polycarbonate 0,45 μm,
– Thermomixer (gamme de température : 25°C – 100°C /agitation orbitale : ≥ 1500 rpm).

Optionnel :
– Pompe à vide,
– Colonne d’ultrafiltration.

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